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聚丙烯酰胺凝膠電泳原理是什么?
聚丙烯酰胺凝膠電泳因在檢測(cè)DNA系列方面取得了顯著班地成績(jī),被各大客戶商廣泛使用的就是變性凝膠電泳,較為熟知的一項(xiàng)技術(shù)應(yīng)用技術(shù)就是簡(jiǎn)稱SSCP的非變性凝膠電泳技術(shù)。
聚丙烯酰胺凝膠電泳原理:在SSCP測(cè)定中,雙鏈DNA(dsDNA)被變性成為單鏈DNA(ssDNA),每一條單鏈DNA都基于它們的內(nèi)部序列而呈現(xiàn)出一種獨(dú)有的折疊構(gòu)象,即使同樣長(zhǎng)度的DNA單鏈因其堿基順序不同、甚至單個(gè)堿基的不同會(huì)形成不同的構(gòu)象。這些單鏈DNA在非變性條件下,用非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳分離,單鏈DNA的遷移率和帶型,都取決于其折疊構(gòu)象和電泳時(shí)的溫度。
聚丙烯酰胺凝膠電泳的絮凝5點(diǎn)要(原)理如下:
:吸附,從分子結(jié)構(gòu)來(lái)看,聚丙烯酰胺就含有極性基因酰胺基,與氫鍵組成了雙核,致使聚丙烯酰胺能夠吸附在物質(zhì)顆粒表面。
第二:絮凝,聚丙烯酰胺擁用數(shù)億ji別的分子量以及萬(wàn)馬奔騰式的分子鏈,數(shù)以龐大ji別的長(zhǎng)鏈能夠很友好的包圍并牢牢地吸附在顆粒周圍,分子之間彼此之間能夠在物質(zhì)的顆粒之間形成橋梁,互相連接,相互聯(lián)系,彼此再也不分的開了,這就組團(tuán)程大顆粒、牢固式的絮凝體,完爆沉淀。
第三:雙電離緊縮,聚丙烯酰胺會(huì)盡全力的發(fā)揮自己的優(yōu)勢(shì)(絮凝、助凝等),使物質(zhì)顆粒相互合體,再以均衡的速度沉淀溶液底部。
第四:聚合橋初顯,分子鏈接會(huì)使聚丙烯酰胺緊緊地固定在一起,不分離、不放棄,較終依靠一起形成聚合橋。
第五:絡(luò)合響應(yīng),聚丙烯酰胺因其特殊的基因酰胺基,會(huì)與溶液中的物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng),形成懸浮半空中的懸浮物。